本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，更具體地，涉及一種用于檢測肺鱗癌的試劑、試劑盒及應用。
背景技術：
1、肺癌是中國及全球范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率最高的腫瘤之一。根據(jù)who數(shù)據(jù)統(tǒng)計，2020年肺癌占所有新發(fā)腫瘤病例的11.4％，占所有腫瘤死亡病例的18％。假陽性是肺癌篩查中常見的一個危害，美國研究者在對53000余例肺癌高風險者隨機進行l(wèi)dct和胸片進行篩查，其中在進行l(wèi)dct篩查中假陽性率高達96.4％，大部分陽性結果在影像學復查時消退。
2、肺癌存在發(fā)病率高、死亡率高、五年生存率低的“二高一低”特點。因此肺癌的早期篩查與早期診斷已成為延長患者生存期、挽救患者生命的關鍵。
3、肺鱗癌全稱肺鱗狀細胞癌，是非小細胞肺癌的其中一個類型，占肺癌總數(shù)的25％～30％，是肺癌中第二高發(fā)的類型。篩選新的生物標志物運用于肺鱗癌的無創(chuàng)診斷，精準識肺鱗癌，對肺癌的早篩、早診、早治工作極為關鍵。
技術實現(xiàn)思路
1、針對現(xiàn)有技術的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供了一種用于檢測肺鱗癌的試劑、試劑盒及應用，以改善現(xiàn)有技術對肺鱗癌的檢測靈敏度和檢測特異性欠佳，檢測準確度低等的技術問題。
2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種用于檢測肺鱗癌的試劑，其為用于檢測樣本中肺鱗癌生物標志物甲基化水平的試劑，所述肺鱗癌生物標志物選自dlx2-as1基因cpg島上的靶區(qū)域。
3、優(yōu)選地，以grch38.p14為參考基因組，上述dlx2-as1基因cpg島上的靶區(qū)域選自chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域。
4、優(yōu)選地，上述試劑包括用于檢測chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域的甲基化水平的甲基化引物對。
5、優(yōu)選地，上述試劑還包括用于檢測chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域的甲基化水平的非甲基化引物對。
6、優(yōu)選地，上述試劑包括seq?id?no.4～5所示的第一甲基化引物對和seq?id?no.6～7所示的第一非甲基化引物對；和/或，seq?id?no.8～9所示的第二甲基化引物對和seqid?no.10～11所示的第二非甲基化引物對。
7、優(yōu)選地，上述試劑還包括探針；
8、上述試劑包括seq?id?no.4～5所示的第一甲基化引物對和seq?id?no.14所示的第一探針；和/或，seq?id?no.8～9所示的第二甲基化引物對和seq?id?no.15所示的第二探針。
9、優(yōu)選地，上述第一探針和上述第二探針的5’端包含有熒光報告基團，上述第一探針和上述第二探針的3’端包含有熒光淬滅基團。
10、本發(fā)明還提供了一種用于檢測肺鱗癌的試劑盒，其包括上述試劑。
11、優(yōu)選地，上述試劑盒還包括內(nèi)參基因的檢測引物對和探針、核酸提取試劑、核酸純化試劑、甲基化轉(zhuǎn)化試劑、擴增試劑、陽性對照品和陰性對照品中的一種或多種。
12、本發(fā)明還提供了上述試劑或上述試劑盒在制備肺鱗癌診斷產(chǎn)品中的應用。
13、總體而言，通過本發(fā)明所構思的以上技術方案與現(xiàn)有技術相比，具有以下有益效果：
14、本發(fā)明提供的用于檢測肺鱗癌的試劑、試劑盒，通過檢測樣本中dlx2-as1基因的靶區(qū)域的甲基化水平，可以有效區(qū)分肺鱗癌受試者和健康受試者，提供了能夠用于肺鱗癌檢測的生物標志物，在實現(xiàn)無創(chuàng)檢測的同時，提高肺鱗癌檢測的靈敏度和特異性。上述試劑盒檢測肺鱗癌血漿樣本的靈敏度可達86.4％，檢測早期肺鱗癌(包括ⅰ期肺鱗癌、ⅱ期肺鱗癌)的靈敏度可達81.0％，檢測晚期肺鱗癌(包括ⅲ期期肺鱗癌、ⅳ期肺鱗癌)的靈敏度可達89.5％，適用于肺鱗癌的早期篩查和診斷；上述試劑盒檢測健康受試者血漿樣本的特異性可達92.1％，檢測準確度高。
1.一種用于檢測肺鱗癌的試劑，其特征在于，其為用于檢測樣本中肺鱗癌生物標志物甲基化水平的試劑，所述肺鱗癌生物標志物選自dlx2-as1基因cpg島上的靶區(qū)域。
2.根據(jù)權利要求1所述的試劑，其特征在于，以grch38.p14為參考基因組，所述dlx2-as1基因cpg島上的靶區(qū)域選自chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的試劑，其特征在于，其包括用于檢測chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域的甲基化水平的甲基化引物對。
4.根據(jù)權利要求3所述的試劑，其特征在于，其還包括用于檢測chr2:172107863-172108263負鏈的全長或部分區(qū)域的甲基化水平的非甲基化引物對。
5.根據(jù)權利要求4所述的試劑，其特征在于，所述試劑包括seq?id?no.4～5所示的第一甲基化引物對和seq?id?no.6～7所示的第一非甲基化引物對；和/或，seq?id?no.8～9所示的第二甲基化引物對和seq?id?no.10～11所示的第二非甲基化引物對。
6.根據(jù)權利要求3所述的試劑，其特征在于，所述試劑還包括探針；
7.根據(jù)權利要求6所述的試劑，其特征在于，所述第一探針和所述第二探針的5’端包含有熒光報告基團，所述第一探針和所述第二探針的3’端包含有熒光淬滅基團。
8.一種用于檢測肺鱗癌的試劑盒，其特征在于，其包括權利要求1～7任一項所述的試劑。
9.根據(jù)權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，其還包括內(nèi)參基因的檢測引物對和探針、核酸提取試劑、核酸純化試劑、甲基化轉(zhuǎn)化試劑、擴增試劑、陽性對照品和陰性對照品中的一種或多種。
10.權利要求1至7任一項所述的試劑或權利要求8或9所述的試劑盒在制備肺鱗癌診斷產(chǎn)品中的應用。